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在实验时怎样挑选到适合自己试验的抗体呢?

发布时间:2020-07-20   点击次数:61次
  一、关于特异性的选择:特异性的选择首要需求考虑四个方面:蛋白特异性、种属特异性、实验方法特异性、符号物的特异性。
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    1、蛋白特异性:针对需求检测的蛋白查找抗体,几个细节要差异,重组表达的蛋白和内源性蛋白的检测,对抗体的要求是不相同的,留心检查抗体阐明书的检测阐明。假定重组蛋白不是全长表达,则需求留心抗体的免疫原区域是否在重组蛋白区域内。
 
    2、种属特异性:同种蛋白不同物种,有着或大或小的差异。现在大部分商品化抗体都是以人源蛋白序列为模板重组蛋白或规划多肽抗原的,根据蛋白的同源性的情况与其他种属发作穿插反应。需求参照阐明书注明的可反应种属信息。一些稀有种属很难找到抗体,能够通过蛋白的序列比对,选择同源序列免疫的抗体。
 
    3、实验方法特异性:现在运用抗体的实验方法有许多,不同的运用方法过程中,由于对蛋白样品的处理方法不相同,蛋白的含量有差异,对抗体的辨认表位和效价要求都是不相同的。具体的根据阐明书注明的产品应用方法进行选择。
 
    4、符号物的特异性一般根据实验操作的实验方法不会运用带有符号的一抗,比方WB、IHC等,都是通过二抗类的试剂符号抵达效果出现的目的。可是根据仪器剖析的一些实验,或许就会运用到直接符号的一抗,比方流式实验。那么需求了解到自己行将运用的仪器能检测到的荧光规模,不通的参数要求选择对应的符号物。在免疫荧光双标实验中,需求选配不同的荧光物。
 
 
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