口蹄疫O型正向血凝抗体检测试剂盒检验步骤和方法

　　口蹄疫O型正向血凝抗体检测试剂盒由预包被口蹄疫O型抗体的酶标板、抗体工作液、抗原液酶标记物及其他配套试剂组成，应用阻断酶联免疫法（ELISA）原理检测牛、羊、猪血清样本中口蹄疫O型抗体。用于检测牛、羊、猪血清中口蹄疫O型抗体，可用于口蹄疫O型疫苗免疫效果评价及辅助诊断。

　　口蹄疫O型正向血凝抗体检测试剂盒检验步骤和方法：

　　1.使用前将试剂盒置室温30分钟以上，恢复至室温（20-25℃）。

　　2.取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2~8℃保存。并用稀释好的洗涤液清洗两遍。

　　3.空白对照孔加样品稀释液50 μL；阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照50 μL；每个孔中加入50μL的酶标记物，轻微震荡混合均匀，37℃孵育30分钟。

　　4.弃去反应液，每孔加入200μL洗涤液，无需静置，甩掉孔中洗涤液，重复清洗5遍，最后在干净的吸水纸上拍干。

　　5.每孔加入底物液100μL，室温避光显色15分钟。

　　7.每孔加入终止液50 μL，混匀，在10分钟内，用450 nm波长（可用630 nm作参比波长）测定各孔吸光值（OD值），无参比波长用空白孔调零（即所有孔吸光值减去空白孔吸光值）。