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猪流感病毒H1N2亚型试剂盒

产品型号:

厂商性质:生产厂家

访问量:97

更新时间:2020-04-09

简要描述:

猪流感病毒H1N2亚型检测试剂盒用于禽白血病病毒 P27 抗原的检测。 本试剂盒是采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(DAS-ELISA)原理来检测禽白血病病毒的P27抗原。检测时,在相应的反应孔中加入阴、阳对照品和待测样品,经温育后,若样品中含有P27抗原,则与酶标板上的抗体结合形成抗原抗体复合物,反之则不能结合。洗涤后,加入的酶标记物与包被板上的抗原抗体复合物发生特异性结合。再次洗涤后加入底物,酶

详细说明:

猪流感病毒H1N2亚型检测试剂盒

组份

1 预包被板条 1/2块 7 阴性对照 2ml

2 酶结合物 11/22ml 8 阳性对照 2ml

3 25倍浓缩洗涤液 30/60ml 9 封板膜 2/4张

4 底物A液 8/16ml 10 说明书 1份

5 底物B液 8/16ml      

6 终止液 6/11ml      

 

猪流感病毒H1N2亚型检测试剂盒用于禽白血病病毒 P27 抗原的检测。 本试剂盒是采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(DAS-ELISA)原理来检测禽白血病病毒的P27抗原。检测时,在相应的反应孔中加入阴、阳对照品和待测样品,经温育后,若样品中含有P27抗原,则与酶标板上的抗体结合形成抗原抗体复合物,反之则不能结合。洗涤后,加入的酶标记物与包被板上的抗原抗体复合物发生特异性结合。再次洗涤后加入底物,酶催化底物反应呈现蓝色,颜色深浅与样品中P27抗原的含量成正相关,从而达到快速检测的目的。

 

需自备的设备及试剂

酶标仪(650 nm)、去离子水、离心管、微量移液器、计时器、离心机(4000r/min)、棉签、氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾等。

 

猪流感病毒H1N2亚型检测试剂盒注意事项

 

  本品仅供体外检测使用。

 

  不同批号试剂盒中的组份不可混用。

 

勿使用过期的试剂盒,已开封的组份应在有效期内       使用。

 

必须使用符合药典规定的水(如蒸馏水、去离子水或纯水)稀释洗涤液。

 

试剂盒各组份在使用前应预先平衡至室温(25±2℃)。

 

未使用的酶标板应放回铝箔袋并封口,2-8℃保存。

 

应避免使用金属类物质盛装和搅拌试剂。

 

勿将底物溶液暴露于强光下。

 

本品终止液为强酸,避免同眼、皮肤接触。

 

移液系统应保证准确清洁,应提供准确溶液体积的同时不造成交叉污染。

 

操作方法

一:试剂配制

a)0.01 mol/L pH=7.4 PBS 溶液:准确称取氯化钠 8.0 g、磷酸氢二钠1.14 g和磷酸二氢钾0.24 g,加入去离子水溶解并定容至1 L。

b)洗涤工作液:使用前,浓缩的洗涤液应恢复至室温(20-25℃),并摇动,使沉淀溶解(*在37℃恒温培养箱中加热5-10 min),然后用蒸馏水作25 倍稀释(例如:30 mL 的浓缩洗涤液加上 720 mL 蒸馏水)匀,稀释好的洗涤液2-8℃可存放7日。

二:样品处理

蛋清:取全蛋,破碎后,直接取蛋清100μL。 泄殖腔拭子:取棉签于待检鸡只泄殖腔取样,然后放入1 mL PBS溶液(0.01mol/L,pH 值 7.4)中,-20℃以下冰箱中冻融一次,待其恢复至室温后,取 100 μL 进行检测。 疫苗:疫苗稀释液将疫苗溶解,再用0.01 mol/L pH=7.4 PBS稀释10-20倍后,取100μL进行检测。 胎粪:无需稀释,可以直接用于检测,若样品中含有沉淀或杂质,需在2000-3000 r/min,离心 10 min,取 100 μL 上清进行检测。

三:操作步骤

取酶标板(根据样品*,可拆开分次使用),阴性对照、阳性对照和待检样品各取100 μL加至相应微孔中,盖好盖板膜,轻轻振荡酶标板10 s,充分混

匀,室温下(25±2℃)避光反应60 min。

注:阴、阳性对照各设2孔,待检样品设1孔。

甩掉孔中的溶液,每孔加入稀释好的洗涤液300μL,震荡洗涤4次,每次30s 左右,在干净吸水纸上拍打去除残存洗涤液。 每孔加入100μL酶标记物工作液,盖好盖板膜,室温下(25±2℃)避光反应60 min。 弃去孔中的溶液,洗涤4次,方法同2。 底物A液与底物B液按1:1混合均匀,加入孔中,100 μL/孔,盖上盖板膜,室温下(25±2℃)反应15 min。

注:底物工作液也可提前配制,但配制完后需5 min内使用。

每孔加入终止液100μL,5 min内测定结果。

注:若终止液出现絮状结晶,可37℃加热,待其溶解后使用。

 

 

结果判定

 

在酶标仪上读各孔OD650nm值,计算出阴性对照孔OD均值NC和阳性对照孔OD均值PC。

注:NC值<0.200且0.500<PC值≤2.000,试验结果才有效。否则,应进行重复试验。

按照公式计算出S/P值:S/P=(SC-NC)/(PC-NC)。

注:SC为被检样品孔OD值。

如果S/P<0.17,说明样品中无禽白血病病毒P27蛋白;如果S/P≥0.17,说明样品中有禽白血病病毒P27蛋白。

 

有效期

贮存方法: 2 - 8oC下贮存。

有效期: 12个月。

 

禽白血病是由禽C型反录病毒群的病毒引起的禽类多种肿瘤性疾病的统称,主要是淋巴细胞性白血病,其次是成红细胞性白血病、成髓细胞性白血病。此外还可引起骨髓细胞瘤、结缔组织瘤、上皮肿瘤、内皮肿瘤等。大多数肿瘤侵害造血系统,少数侵害其他组织

 



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