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猪链球菌检测试剂盒(通用型)说明书

产品型号:

厂商性质:生产厂家

访问量:28

更新时间:2020-06-11

简要描述:

猪链球菌(通用型)检测试剂盒说明书

利用ELISA进行检验常见的样本一般包括血液(指血,静脉血),尿,粪便,脑脊液,胸腹水,前列腺液,精液,阴道分泌物等,这些样本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。

详细说明:

25T/50T 40

产品名称:猪链球菌(通用型)检测试剂盒说明书

检测方法: 实时荧光 PCR

    格: 50T

保存方式: 2~8

  期: 1

    地: 中国

    途: 仅用于科研实验

猪链球菌(通用型)检测试剂盒

 1.报价含普票、运费。
 2.进口原装产品要3-6周的货期,详细情况请咨询客服。
 3.订货时间为工作日每周一至周五17:00之前。
 4.如因单位财务制度原因,可申请先发货,报账后付款(此条款仅限医院、学校信誉良好的 客户)。

猪链球菌(通用型)检测试剂盒说明书

利用ELISA进行检验常见的样本一般包括血液(指血,静脉血),尿,粪便,脑脊液,胸腹水,前列腺液,精液,阴道分泌物等,这些样本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。

1、抗原:ELISA抗原有三类:液体中纯化的自然抗原、合成抗原和基因重组抗原。

纯度不高可导致试剂盒的特异性不强,合成抗原一般都是多肽抗原,

试剂盒一般为基因重组抗原。抗原纯度不高,特异性就不强,

2、抗体特异性和亲和力的大小会影响试剂盒的特异性和敏感性

3、酶结合物,试剂盒的保存时间通常由酶的稳定性决定。

常用的就是辣根过氧化酶-HRP.其他还有碱性磷酸酶和β半乳糖苷酶。

ELISA温浴和洗涤一般为磷酸盐缓冲液(PBS

碱性磷酸酶的话就不能用PBS洗涤了,因为残留的PBS会抑制一半的酶活性。

TMB显色液取代了OPDHRP常用的色原底物。为氧化还原反应(OPD对机体有突变作用,所以改用TMB

 注意事项
1.本试剂检测灵敏度高。为了防止污染,实验要分区操作。
   1)第1区:样本制备区。
 2)第二区:模板添加区。
   3)第三区:扩增及产物分析区。
    分区之间*进行物理性隔离,避免人为因素造成的污染。
2.实验过程中穿戴工作服和乳胶手套,不同区域独立使用工具,需更换手套和实验服。
3.严格按照操作步骤操作,试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
4.反应液中的成分对光敏感,应避光保存。试剂使用前要完全解冻,但应避免反复冻融,推荐使用前离心30秒,并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。
5.反应结束后,扩增管请置于密封袋内丢弃,当日清理,开盖易造成气溶胶污染,禁止开盖。
6.不同批号试剂请勿混合使用,在有效期内使用。
 

操作步骤
1  病毒 RNA 的提取
1.1  取已处理的样品、阴性对照和阳性对照,分别加入裂解液 600 μL,充分颠倒混匀,室温静置 3

5 min

1.2  将液体吸入吸附柱中(吸附柱要套上收集管,吸取液体时尽量不要吸到悬浮杂质,以免离心时 堵塞吸附柱),13000 rpm 离心 30 s

1.3  弃去收集管中液体,加入 600 μL 洗液,13000 rpm 离心 30 s

1.4 重复步骤 1.3

1.5 弃去收集管中液体,13000 rpm 空柱离心 2 min,以除去残留的洗涤液。

1.6  将吸附柱移入新的 1.5 mL 离心管中,向柱中央加入洗脱液 50 μL,室温静置 1 min13000 rpm

离心 30 s,离心管中液体即为模板 RNA

2  实时荧光 RT-PCR 操作
设被检样品、阴性对照和阳性对照总和为 N,则反应体系配制如下: 试剂 体系



无菌无核酸酶水 2.7N+1μL

RT-PCR 
反应液 10N+1μL

酶混合液 0.4N+1μL

荧光探针 1.9N+1μL



将以上配制的反应体系充分混匀后,分装每个反应管中各 15 μL

分别取 5 μL 模板 RNA,加入相应反应管中,混匀并作好标记,在荧光 PCR 仪上进行以下反应:

45  15 min95  1min95  5 s60  35 s,在每个循环第二步(60 35s)收集荧光信号,共

40 个循环。(报告基团“FAM”,淬灭基团“None”)。

 



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