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猪细小病毒检测试剂盒说明书

产品型号:

厂商性质:生产厂家

访问量:827

更新时间:2024-07-10

简要描述:

猪细小病毒检测试剂盒说明书原理

本试剂盒针对猪细小病毒的高度保守区域设计特异性引物和探针,在反应体系中含猪细小病毒基因组模板的情况下,PCR反应得以进行并释放荧光信号。利用荧光定量PCR仪对PCR过程中相应通道信号进行实时监测和输出,实现检测结果的定性分析。

详细说明:

猪细小病毒抗体检测试剂盒(酶联免疫法)

使用说明书


产品名称

通用名:猪细小病毒抗体检测试剂盒(酶联免疫法)


包装规格

96T×1/


检测原理

   本试剂盒由预包被猪细小病毒重组蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测猪血清、血浆样本中猪细小病毒抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本,经温育后若样品中含有猪细小病毒抗体,则将与酶标板上抗原结合,经洗涤除去未结合的其他成分后;再加入酶标记物,与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物,在孔中加TMB底物液,与酶标结合物反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有猪细小病毒抗体。


试剂盒组成

序号

名称

规格/96T×1

1

酶标记物

12ml×1(红盖)

2

样品稀释液

22ml×1(黄盖)

3

20X浓缩洗涤液

40ml×1(蓝盖)

4

底物液A

6ml×1(白盖)

5

底物液B

6ml×1(黑盖)

6

终止液

12ml×1(黄盖)

7

阳性对照

1.0 ml×1(红盖)

8

阴性对照

1.0 ml×1(绿盖)

9

酶标板

96T×1

10

封板膜

1

11

说明书

1


储存及有效期

28℃保存,有效期12个月。

包被板开封后请于28℃避光保存,避免受潮。使用期限为2个月。


适用仪器

450nm波长的酶标仪,37℃恒温设备,可调微量移液器。


样品准备

1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于28℃保存,长期需置-20℃保存。

2.根据样本数量准备对应数量的小刻度EP管或血清稀释盘,用样品稀释液将待检血清按50倍稀释(如4μl血清加入196μl样品稀释液中,混匀)阴性、阳性对照不用稀释。

3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释成工作洗涤液(19份蒸馏水或去离子水加1份浓缩洗涤液)


检验方法

1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。

2.取所需用量酶标板条,设阴性、阳性对照各1孔,未用的板条尽快密封,28℃保存。

3.阴性、阳性对照孔分别加入阴性、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl

4.混匀,盖好盖板膜,置37℃温箱孵育30分钟。

5.甩去孔内液体,每孔加250ul工作洗涤液,用震荡混匀的方式洗涤60秒后弃去,重复洗涤5次,每次洗涤后需拍干液体。

6.每孔加酶标记物100μl,置37℃避光反应30分钟。

7.甩去孔内液体,每孔加250ul工作洗涤液,用震荡混匀的方式洗涤60秒后弃去,重复洗涤5次,每次洗涤后需拍干液体。

8.根据样本数量将显色液A与显色液B按等体积比例混匀配置为底物工作液,现配现用。每孔加100ul,置37℃避光反应10分钟。

9.每孔加终止液100μl,混匀,于450nm 测定各孔吸光值(OD值),


参考值

实验正常的情况下,阳性对照OD-阴性对照OD0.2


检验结果的解释

1. S/P(样本OD-阴性对照OD)/(阳性对照OD-阴性对照OD)

2. S/P0.4时结果判读为阳性。

3. 0.2S/P0.4时结果为疑似阳性;若接种过对应疫苗,则提示抗体水平不足,建议补打疫苗。

4. S/P0.2时结果判读为阴性。


试验方法的局限性

1. 本试剂盒仅作为定性检测猪血清、血浆中猪细小病毒抗体的粗略评估。

2. 本试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验。


注意事项

1.实验操作时需戴手套、穿工作衣,严格健全和执行消毒隔离制度,各种实验废弃物都应按传染物处理。

2.终止液具有腐蚀性,应避免接触皮肤和衣物,如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。

3.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋,未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。

4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶,使用时需恢复至室温以*溶解。

5.洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。

6.用于检测的样品应保持新鲜。

7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。

8.不同批号试剂组分不得混用。


生产企业

企业名称:赛诺利康生物技术(北京)有限公司

地    址:北京市昌平区科技园超前路甲111号楼7





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