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猪伪狂犬病病毒野毒株检测试剂盒说明书

产品型号:

厂商性质:生产厂家

访问量:867

更新时间:2020-06-12

简要描述:

订购流程:猪伪狂犬病病毒野毒株检测试剂盒

电话或通过在线客服咨询产品→确定产品→提供单位收货信息→确立合同→安排发货。

1.报价含普票、运费。
2.进口原装产品要3-6周的货期,详细情况请咨询客服。
3.订货时间为工作日每周一至周五17:00之前。
4.如因单位财务制度原因,可申请先发货,报账后付款(此条款仅限医院、学校信誉良好的 客户)。

详细说明:

产品名称:猪伪狂犬病病毒野毒株检测试剂盒说明书


    格: 50T
检测方法: 实时荧光 PCR

保存方式: 2~8

  期: 1

    地: 中国

    途: 仅用于科研实验

订购流程猪伪狂犬病病毒野毒株检测试剂盒

电话或通过在线客服咨询产品确定产品提供单位收货信息确立合同安排发货。

 1.报价含普票、运费。
 2.进口原装产品要3-6周的货期,详细情况请咨询客服。
 3.订货时间为工作日每周一至周五17:00之前。
 4.如因单位财务制度原因,可申请先发货,报账后付款(此条款仅限医院、学校信誉良好的 客户)。

1. 样品处理(样本处理区)

1.1 样本前处理

组织:取50mg左右组织用玻璃匀浆器匀浆,匀浆后置入洁净的1.5ml离心管中;
液体标本:取适量标本13000rpm离心2min,弃上清。
1.2 DNA提取

1) 对上述处理好的标本加入40ul 核酸提取液,100恒温处理10分钟,13,000 rpm离心5分钟,取上清液转移至新的1.5ml EP管,-20保存;
2. 试剂配制(试剂准备区)

根据代检测样本总数,设所需要的PCR反应管管数为NN=样本数+1

管阴性对照+1管阳性对照),体系配制如下表:

试剂

WSSV 反应液

酶液

用量(样本数为N

20μl

1μl

3. 
加样(样本处理区)

将步骤1提取的DNA、阳性质控品、阴性质控品各取4μl,加入相应的

反应管中,盖好管盖,混匀,短暂离心。

4. PCR扩增(核酸扩增区)

4.1 将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内;

5. 结果分析判定

结果分析条件设定
设置基线(baseline):一般情况下,对ABI 75007700等仪器设为6-15cycle,对PE5700设为3-15cycle,MJ Research Option2设为6-12cycle。特殊情况可对基线适当调整。
设置阈值(threshold:以阈值线刚超过阴性对照扩增曲线(无规则的噪音线)的至高点。
结果判断
阳性:检测样本Ct值小于等于35.0,且曲线有明显的指数增长期;
可疑:检测样本Ct值大于35.0且小于40.0,重复一次实验,如果Ct值仍小于40.0,且曲线有明显的指数增长期,为阳性,否则为阴性;
阴性:检测不到样本Ct值或Ct值为40
6. 对检验结果的解析

实验室环境污染,试剂污染,标本交叉污染会出现假阳性结果;试剂运输,保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,出现假阴性或定量检测不准确的结果。

7. 质控标准

阴性质控品:扩增曲线无对数生长期或无Ct值显示;
阳性质控品:扩增曲线有明显对数生长期,且Ct≤32;
以上条件应同时满足,否则实验视为无效。
 

 



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