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猪繁殖与呼吸综合征病毒试剂盒使用步骤

产品型号:

厂商性质:生产厂家

访问量:19

更新时间:2020-06-16

简要描述:

【原理】
本试剂盒是采用猪蓝耳病病毒N基因的基因工程表达产物包被检测板。在试验中,加入稀释的对照血清和待检血清,经温育后,若样品中含有猪蓝耳病N蛋白的特异性抗体,则将与检测板上抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后;再加入酶标二抗,与检测板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶结合物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,加入HF溶液终止反应后,用酶标仪630nm波长测

详细说明:

猪繁殖与呼吸综合征病毒ELISA抗体检测试剂盒
使用说明书
【简介】
试剂盒由抗原包被的微孔板,酶标羊抗猪IgG及其它试剂制成,应用间接ELISA原理检测猪血清中抗蓝耳病N蛋白的抗体。
【用途】
猪蓝耳病ELISA诊断试剂盒用于检测猪血清中抗蓝耳病N蛋白的抗体。评估猪场蓝耳病疫苗免疫状况。感染猪的血清学诊断。
【原理】
本试剂盒是采用猪蓝耳病病毒N基因的基因工程表达产物包被检测板。在试验中,加入稀释的对照血清和待检血清,经温育后,若样品中含有猪蓝耳病N蛋白的特异性抗体,则将与检测板上抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后;再加入酶标二抗,与检测板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶结合物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,加入HF溶液终止反应后,用酶标仪630nm波长测定各反应孔中的OD值。
【试剂盒主要成分】 
1 包被抗原的检测板 2块 (96孔/板)
2 阴、阳性对照血清 各1管 (1ml/管)
3 羊抗猪酶标二抗 1瓶 (20ml/瓶)
4 20倍浓缩洗涤液 1瓶 (30ml/瓶)
5 底物A液、B液 各1瓶 (10ml/瓶)
6 终止液 1瓶 (10ml/瓶)
7 样品稀释液 1瓶 (50ml/瓶)
8 血清稀释板 2块 (96孔/板)
9 说明书 1张
【样品制备】
取动物全血,按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血。
【洗涤液配制】
使用前,浓缩的洗涤液应恢复至室温(25℃左右),并摇动使沉淀的盐溶解(在37℃水中加热5-10min),然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释(例如:每板用20 ml浓缩液加上380ml水),稀释好的洗涤液在4℃可以存放7天。
【样品稀释】
待检血清1:40稀释:具体为在血清稀释板中按1:40稀释待检血清(195μl样品稀释液中加5μl待检血清,混匀即可)。
注意:阳性和阴性对照1:4稀释,(例如:180μl样品稀释液中加60μl对照血清,吹打均匀)。
【注意事项】
1 试剂盒使用前各试剂应平衡至室温,使用后放回2-8℃。
2 不同批号试剂盒的试剂组分不得混用,使用试剂时应防止试剂污染。
3 不要用口移液。
4 TMB(底物液B)不要暴露于强光,避免接触氧化剂。 
5 检测板拆封后避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中,应尽快置于4℃)。
6 待检血清样品数量较多时,应先使用血清稀释板稀释完所有要检测血清,再将稀释好的血清转移到反应板,使反应时间一致。
7 浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释,如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。
8 在操作过程中移液时,切忌将气泡加入检测板孔中。
9 严格按照操作说明书可以获得的结果,操作过程中移液,定时和洗涤等的全过程必须。
【操作步骤】 
1 取检测板(根据样品多少可拆开分次使用),用稀释好的洗涤液洗板2次(200µl/孔)每次静置2分钟后倒掉,再在干净吸水纸上拍干。
2 取稀释好的待检样品100μl加入到检测板中;阴性对照和阳性对照各设2孔,每孔100μl;轻轻振匀孔中样品(勿溢出),置37℃温育30分钟。
3 甩掉板孔中的溶液,用洗涤液洗板3次,200μl/孔,每次静置3分钟倒掉,再在干净吸水纸上拍干。
4 每孔加羊抗猪酶标二抗100μl,置37℃温育30分钟。
5 洗涤5次, 方法同3。切记每次在干净吸水纸上拍干。
6 每孔先加底物液A一滴(50µl)、再加底物液B一滴(50µl),混匀,室温(18℃-25℃)避光显色10分钟。
7 每孔加终止液1滴(50μl),10分钟内测定结果(检测前在震荡器上轻轻震动一下)。
【结果判定】在酶标仪上测各孔OD630值。试验成立的条件是阳性对照孔平均OD630值大于或等于1.0,阴性对照孔平均OD630值必须小于0.3。 
样品OD630值大于0.42,判为阳性;样品OD630值在0.38到0.42之间,判为可疑;样品OD630值小于0.38,判为阴性。
注意:用620 ~650纳米波长测定结果均有效。
【贮 存】2-8℃避光保存 
【有 效 期】6个月

技术指标 
猪繁殖与呼吸综合征病毒ELISA抗体检测试剂盒
使用说明书
【简介】
试剂盒由抗原包被的微孔板,酶标羊抗猪IgG及其它试剂制成,应用间接ELISA原理检测猪血清中抗蓝耳病N蛋白的抗体。
【用途】
猪蓝耳病ELISA诊断试剂盒用于检测猪血清中抗蓝耳病N蛋白的抗体。评估猪场蓝耳病疫苗免疫状况。感染猪的血清学诊断。
【原理】
本试剂盒是采用猪蓝耳病病毒N基因的基因工程表达产物包被检测板。在试验中,加入稀释的对照血清和待检血清,经温育后,若样品中含有猪蓝耳病N蛋白的特异性抗体,则将与检测板上抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后;再加入酶标二抗,与检测板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶结合物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,加入HF溶液终止反应后,用酶标仪630nm波长测定各反应孔中的OD值。
【试剂盒主要成分】 
1 包被抗原的检测板 2块 (96孔/板)
2 阴、阳性对照血清 各1管 (1ml/管)
3 羊抗猪酶标二抗 1瓶 (20ml/瓶)
4 20倍浓缩洗涤液 1瓶 (30ml/瓶)
5 底物A液、B液 各1瓶 (10ml/瓶)
6 终止液 1瓶 (10ml/瓶)
7 样品稀释液 1瓶 (50ml/瓶)
8 血清稀释板 2块 (96孔/板)
9 说明书 1张
【样品制备】
取动物全血,按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血。
【洗涤液配制】
使用前,浓缩的洗涤液应恢复至室温(25℃左右),并摇动使沉淀的盐溶解(在37℃水中加热5-10min),然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释(例如:每板用20 ml浓缩液加上380ml水),稀释好的洗涤液在4℃可以存放7天。
【样品稀释】
待检血清1:40稀释:具体为在血清稀释板中按1:40稀释待检血清(195μl样品稀释液中加5μl待检血清,混匀即可)。
注意:阳性和阴性对照1:4稀释,(例如:180μl样品稀释液中加60μl对照血清,吹打均匀)。
【注意事项】
1 试剂盒使用前各试剂应平衡至室温,使用后放回2-8℃。
2 不同批号试剂盒的试剂组分不得混用,使用试剂时应防止试剂污染。
3 不要用口移液。
4 TMB(底物液B)不要暴露于强光,避免接触氧化剂。 
5 检测板拆封后避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中,应尽快置于4℃)。
6 待检血清样品数量较多时,应先使用血清稀释板稀释完所有要检测血清,再将稀释好的血清转移到反应板,使反应时间一致。
7 浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释,如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。
8 在操作过程中移液时,切忌将气泡加入检测板孔中。
9 严格按照操作说明书可以获得的结果,操作过程中移液,定时和洗涤等的全过程必须。
【操作步骤】 
1 取检测板(根据样品多少可拆开分次使用),用稀释好的洗涤液洗板2次(200µl/孔)每次静置2分钟后倒掉,再在干净吸水纸上拍干。
2 取稀释好的待检样品100μl加入到检测板中;阴性对照和阳性对照各设2孔,每孔100μl;轻轻振匀孔中样品(勿溢出),置37℃温育30分钟。
3 甩掉板孔中的溶液,用洗涤液洗板3次,200μl/孔,每次静置3分钟倒掉,再在干净吸水纸上拍干。
4 每孔加羊抗猪酶标二抗100μl,置37℃温育30分钟。
5 洗涤5次, 方法同3。切记每次在干净吸水纸上拍干。
6 每孔先加底物液A一滴(50µl)、再加底物液B一滴(50µl),混匀,室温(18℃-25℃)避光显色10分钟。
7 每孔加终止液1滴(50μl),10分钟内测定结果(检测前在震荡器上轻轻震动一下)。
【结果判定】在酶标仪上测各孔OD630值。试验成立的条件是阳性对照孔平均OD630值大于或等于1.0,阴性对照孔平均OD630值必须小于0.3。 
样品OD630值大于0.42,判为阳性;样品OD630值在0.38到0.42之间,判为可疑;样品OD630值小于0.38,判为阴性。
注意:用620 ~650纳米波长测定结果均有效。
【贮 存】2-8℃避光保存 
【有 效 期】6个月

 



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