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猪瘟抗体检测试剂盒出厂价格

产品型号:

厂商性质:生产厂家

访问量:10

更新时间:2020-08-28

简要描述:

猪瘟抗体检测试剂盒出厂价格
猪瘟E2(CSFV-E2)抗体ELISA检测试剂盒,可以从猪的血液样品中检测到CSFV-E2抗体的量。微量板用CSFV-E2蛋白包被,将稀释的猪血清样品加入到微量孔中,样品中CSFV-E2抗体将与包被的抗原形成抗原抗体复合物。非特异性抗体和其它血清蛋白被洗去。将碱性磷酸酶标记的抗猪IgG抗体加入孔中,与抗原抗体复合物结合,然后再洗去未反应的结合物。

详细说明:

96T/192T  900/1800

 猪瘟抗体检测试剂盒

猪瘟E2(CSFV-E2)抗体ELISA检测试剂盒,可以从猪的血液样品中检测到CSFV-E2抗体的量。微量板用CSFV-E2蛋白包被,将稀释的猪血清样品加入到微量孔中,样品中CSFV-E2抗体将与包被的抗原形成抗原抗体复合物。非特异性抗体和其它血清蛋白被洗去。将碱性磷酸酶标记的抗猪IgG抗体加入孔中,与抗原抗体复合物结合,然后再洗去未反应的结合物。PNPP显色剂作为底物被加入,如果CSFV-E2抗体存在,则显黄色。颜色强度直接与样品中的该抗体的量有关。

提供的试剂

包被板(Coated plates):包被重组猪瘟E2蛋白抗原的微量板。

酶标二抗(Conjugate reagent):碱性磷酸酶标记的抗猪抗体:内含蛋白稳定剂红色染料的磷酸盐缓冲液。

底物片(Substrate tablets) PNPP(4-**苯磷酸二钠盐):用底物缓冲液溶解后使用。

底物缓冲液(Substrate buffer):含有与酶反应相关物质的二乙醇(胺)缓冲液。

终止液(Stop Solution):含有NaOH的二乙醇(胺)缓冲液。

样品稀释液(Sample Diluent):含有蛋白稳定剂

洗液(Wash Buffer):含有吐温的磷酸盐缓冲液(粉)。

阴性对照(Negative Control):灭活的无CSFV抗体的磷酸盐缓冲液:内含有蛋白稳定剂和die氮化钠防腐剂(0.1% 重量/体积)及蓝色染料。

阳性对照(Positive Control):含特异性CSFV抗体的磷酸盐缓冲液:内含有蛋白稳定剂和die氮化钠防腐剂(0.1% 重量/体积)及红色染料。

材料和设备要求(试剂盒未提供)

准确的微量移液器和一次性吸头

8或12孔道的微量移液器

稀释样品的塑料管

蒸馏水或去离子水

含405nm波长的酶标仪

注意事项

1.处理各种试剂要小心。终止液中含有腐蚀性的强碱,如果溅到皮肤或眼中,用大量的清水洗涤。

2.把各种生物材料都看成具有潜在的生物危险性物,包括所有的外来样品。在销毁之前,要用漂白(粉)或其它强氧化剂,将用过的反应板和废弃液进行消毒。

3不要用嘴碰移液器。在使用试剂盒中的试剂和处理样品的地方,不要吃东西,喝水或吸烟。

4试剂盒仅供体外使用

5.严格按照检测规程操作才能取得较好的结果。

试剂的准备

1底物试剂:1底物放入洁净容器中,加入5.5-6ml的底物缓冲溶液,混合直到完全溶解。本试剂很好是现用现配,配置好的底物溶液可以在+4℃下避光保存1周。请勿用手直接触拿底物片。

2洗液:1洗液完全倒入1蒸馏水或去离子水中,混合使其完全溶解。洗液可在+4℃保存1个月。

3.试剂盒中的其它成分可以直接使用,使用前要回温至室温(22-27℃)。

样品的准备

每个样品按照1:30稀释,即在样品稀释板上用10μl样品加290μl的样品稀释液,并在预稀释板上记录好样品和对照的位置。

1.用旋涡混合器或振荡器混合均匀。

2.每份样品都要换一个未用过的新的吸头。

试剂盒中的阳性和阴性对照不要稀释!!

BioChek公司的CSFV-E2试剂盒可以通过两种方式来进行实验:一种是样品孵育过夜来提高其敏感性;另一种是孵育较少时间来进行快速诊断。

双重测试操作步骤

1.从密封袋中取出用CSFV-E2包被的反应板,在记录纸上记录样品的位置。

2.在A1和B1孔中加入100μl的阴性对照。

3.在C1和D1孔中加入100μl的阳性对照。

4.将100μl稀释好的样品加入到相应的板孔中,用盖子盖住反应板,在室温(22-27℃)下孵育60分钟孵育过夜(4-8℃)来提高其敏感度。

5.倒出孔中的内容物,用洗液洗4次(每孔300μl)。最后一次倒转反应板,在吸水纸上轻轻拍打。

6.各孔加100μl酶标二抗,用盖子盖住反应板,在室温(22-27℃)下孵育30分钟

7.重复步骤5。

8.各孔加100μl底物试剂,用盖子盖住反应板,在室温(22-27℃)下孵育15分钟

9.各孔加100μl终止液,终止反应。

10.空气调零,以405nm的波长于酶标仪测定各孔的吸光度。

结果

为确保试验有效,阴性对照的平均吸光度应该小于0.35,阳性对照的平均值和阴性对照的平均值之差应大于0.15

实验室中温度的差异会造成OD值的偏高或偏低。根据实验对照的结果判定实验的有效性。

结果判定

样品中抗体的相对含量可以参考阳性对照来计算,其关系可以通过S/P值(样品和阳性对照的比值)来计算。

1.S/P值的计算

样品的S/P值大于或等于0.5认为是阳性。

2.抗体滴度的计算

Log10效价=1.1×Log10S/P + 3.361

逆对数=效价

3.判定标准

S/P值效价范围抗体状况

≤0.499    ≤1070    阴性

≥0.500    ≥1071   阳性

 



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