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高致病性猪蓝耳病病毒试剂盒使用步骤

产品型号:

厂商性质:生产厂家

访问量:30

更新时间:2020-06-17

简要描述:

合适的Anneal温度通常在45~68℃之间 (预备实验可2℃间隔进行)。另外,由于在60~68℃间,也有很高的活性, 因此可在此温度范围内设定Anneal-Extension温度, 进行2 Step PCR。Anneal-Extension温度为68℃ 时,每kbp大体可设定30秒~1分钟;当温度设定在68℃以下时, 时间设定可稍长一些。通常,Anneal温度太高,有时会得不到扩增产物;Anne

详细说明:

高致病性猪蓝耳病病毒(PRRSV-M)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

 

高致病性猪蓝耳病病毒(PRRSV-M)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)中含有聚合酶链式反应所需要各种试剂组分,如:引物、dNTPs、缓冲液、Taq酶等,PCR反应液混合液中加入检测样品,即可进行PCR扩增反应。PCR扩增产物经琼脂糖电泳染色判断,阳性样本将在相应大小的片段处出现特异性条带。

规格: 50T/100T

分类:pcr-荧光试剂盒

储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。

运输:低温、避光,快递免费送货上门。

高致病性猪蓝耳病病毒(PRRSV-M)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)产品特点:

◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;

◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;

◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;

◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

需要注意什么:

PCR反应液请在冰中配制,然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法(Cool Start Method)与热启动法(Hot Start Method)相结合,更能有效地减少PCR过程中的非特异性反应,增强PCR扩增的特异性,能得到良好的PCR结果。

PCR的反应条件:

因扩增片段的大小、反应体积、使用扩增仪器的不同而不同。

◇ 循环次数

根据模板DNA的量以及扩增片段的大小,设定25~30个循环。

如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,则会出现Smear。

◇ Anneal以及Extension

合适的Anneal温度通常在45~68℃之间 (预备实验可2℃间隔进行)。另外,由于在60~68℃间,也有很高的活性, 因此可在此温度范围内设定Anneal-Extension温度, 进行2 Step PCR。Anneal-Extension温度为68℃ 时,每kbp大体可设定30秒~1分钟;当温度设定在68℃以下时, 时间设定可稍长一些。通常,Anneal温度太高,有时会得不到扩增产物;Anneal温度太低时,容易发生非特异性反应。另外,Extension时间太短时,会得不到扩增产物或者会有一些短的非特异性产物优成;而Extension时间太长时,会出现Smear。

 



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